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    取风干土壤,用粗筛(50~100目)过筛去除土块和杂物。称取过筛土壤500g,加入一定量的卵孢子悬浮液,使每克土壤中的卵孢子不少于1500个,再加入一定量的水,拌匀,将土壤调至一定的含水量。将调配好的土样装入双层塑料袋中,将袋口扎紧,置一定的温度条件下,定期取样检查。检测时,每次从塑料袋中取土样5g,加入50ml水,用玻捧充分搅拌后,立即用2O0、300和500目筛网过滤,收集500目筛网上滤得的残留物。在残留物中加入0.05% MTT[3(4· 5dimethylthiazo1-2-yl)2· 5dipheny1-2H-tetrazoliutll bromide],置35°C温箱中染色48小时。将染色后的卵孢子制片镜检,观察残留物中卵孢子的颜色并计数。卵孢子呈蓝色表示已渡过休眠期进入可萌发状态;呈玫瑰红色的卵孢子仍存活,但处于休眠期;呈黑色和未染上色的表示已丧失活力。
    这一方法可较直观地检测卵孢子是否存活。试验中,土样的含水量及土样装袋后置于何种温度下保存,可以根据不同的实验要求选择确定。

    发布时间: 2009-05-11 19:24 浏览次数:   【 打 印 】【 关 闭
     
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