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  • 影响因素

      
    主要与产生卵孢子菌株的生物学特性、光照条件、卵孢子龄期、温度、营养、化学物质处理等因素有关。要诱导卵孢子萌发并获得较高的萌发率,必需在诸多影响因素中找到各因素的最佳组合,创造最适合卵孢子萌发的条件。
    1.产生卵孢子亲本菌株的生理特性
    不同疫霉菌株或不同菌株配对组合产生的卵孢子,其卵孢子萌发率有一定差异,有的较容易诱导萌发,而有的则较困难。对不同的疫霉种,获得最高萌发率所需的条件也会有差异。一般而言,同宗配合疫霉菌产生的卵孢子较容易诱导萌发,而对异宗配合的疫霉菌,要获得较高的卵孢子萌发率难度较大。同时,产生卵孢子的方法不同,卵孢子的萌发率也会有较大差异。采用直接配对方法产生的卵孢子萌发率较高,而采用聚碳膜间隔配对诱导菌株自交产生的卵孢子萌发率较低。例如,掘氏疫霉菌株直接配对产生的卵孢子萌发率可达70%~80%,而通过聚碳膜间隔配对方法产生的卵孢子仅为10%~20%左右。
    2.光照条件 在卵孢子保存使其完成生理后熟过程中,是否给予光照对卵孢子的萌发率影响不大。但在卵孢子涂布于s+L培养基上诱导萌发过程中,光照可以显著地提高卵孢子萌发率,对卵孢子萌发有明显的促进作用。例如,掘氏疫霉在光照条件下萌发率达70%~80%,在黑暗中仅19%~22%;苎麻疫霉在光照和黑暗条件下萌发率分别为92%和13%。不同光照条件和光波长对刺激不同的疫霉菌的卵孢子萌发效果也不同。烟草疫霉(寄生疫霉丿在日光灯连续光照下,卵孢子萌发率达93%;苎麻疫霉用黑光灯(主要是短波长的蓝紫光)光照效果最好,其次为日光灯;掘氏疫霉卵孢子在8小时黑光灯与16小时日光交替光照条件下的萌发率高于仅用日光灯光照的萌发率。
    3.卵孢子龄大多数疫霉菌的卵孢子在形成后需要一定时期的休眠才能萌发。在一定时期内,卵孢子的萌发率随卵孢子的保存时间增加而提高。使疫霉菌卵孢子进入可刺激萌发状态所需的卵孢子保存天数(龄期)因不同的疫霉菌种类而有一定差异。桂氏疫霉(P.katsurae)的卵孢子在形成后1星期内萌发率为零,保存4~8星期的卵孢子萌发率最高;掘氏疫霉15天龄期的卵孢子萌发率为53%,30~45天龄期的卵孢子萌发率最高;苎麻疫霉6天龄期的卵孢子萌发率为40%左右,35~45天的卵孢子萌发率达80%以上。
    4.温度 某种疫霉菌的菌丝最适生长温度通常也是该种疫霉菌卵孢子完成生理后熟和诱导萌发的最适温度,对绝大多数疫霉种,在24~28°C之间。但在诱导卵孢子萌发前,用较高或较低的温度对卵孢子做短期预处理可能刺激或抑制卵孢子萌发。例如,掘氏疫霉卵孢子在33°C下预处理2~8天可提高萌发率,在36°C下预处理萌发受到抑制;棕榈疫霉卵孢子在12和30°C下预处理7天可提高萌发率,在33°C下预处理抑制萌发
    5.营养条件 适合于不同疫霉菌种类卵孢子萌发的营养成份有一定差异。一般而言,卵磷脂、Cu++可以提高大多数疫霉种的卵孢子萌发,而蔗糖、果糖、葡萄糖对卵孢子萌发有抑制作用。此外,寄主植物的某些成份,如笥蓿根浸出液,对大雄疫霉卵孢子萌发有利。在已报道的各种诱导卵孢子萌发的培养基中,以S+L培养基效果最好。
    6.化学物质刺激处理 用KMnO4、H202处理卵孢子有利于打破卵孢子的休眠,刺激卵孢子萌发,显著提高萌发率,同时可以抑制卵孢子悬浮液中菌体残余的萌发和生长,对进行单卵孢子分离获得单卵孢株纯培养很有帮助。对不同的疫霉种,KMnO4的最佳处理浓度有一定差异,例如刺激烟草疫霉(寄生疫霉)卵孢子萌发的最佳浓度为0.25%,掘氏疫霉为0.2%,苎麻疫霉为0.1%。此外,用蜗牛酶、纤维素酶处理,消解、破坏卵孢子的细胞壁,对一些疫霉菌的卵孢子萌发也有一定的促进作用。

    发布时间: 2009-05-11 19:16 浏览次数:   【 打 印 】【 关 闭
     
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