站内搜索:  

  网站首页           关于我们            新闻动态            疫 霉 菌            疫病控制            文献中心            研究成果            用户登录  
 
 

研究单位

  • 安徽农业大学
  • 国家大豆改良中心
  • 河北大学
  • 河北农业科学院植保所
  • 黑龙江农业大学
  • 黑龙江农业科学院植保所
  • 南京农业大学植物病理系
  • 西北农业大学
  • 云南农业科学院植保所
  • 云南师范大学
  • 中国农业科学院作物所
  • 安徽农业科学院作物所
  • 东北农业大学


  • 分离、检测厚垣孢子的方法和步骤

      
    从土壤中分离和检测厚垣孢子的方法步骤如下:
    1.取田间病土用粗筛筛去石粒和植物未腐败残体
    2.称取过筛的土壤50g,加水500ml,在匀浆机中匀浆(3000转/分)1分钟,立即将上清液经孔径149、61、44和38um的筛网过滤,收集滤过液
    3.在匀浆杯中加入200ml水,将沉淀于底部的土壤重新悬浮,匀浆20秒后再过滤。收集滤过液,与第一次的滤过液混合。
    4.用少量的水冲洗各筛网,将网上滤得的残留物分别收集在三角瓶中
    5.将步骤2和3获得的滤过液经孔径38um的筛网反复过滤3次,收集滤得的网上残留物,倒掉过液
    6.将步骤4和5各筛网上滤得的残留物悬浮液分别倒在选择性培养基平板上:将其中的土壤颗粒和厚垣孢子均匀涂布于平板上,并使之完全淹没在悬浮液溶液内选择性培养基的制各是将澄清的V8汁1ml,水99ml,洋菜2g,混合灭菌后,加入制霉菌素5mg,五氯硝基苯1mg,氨卞青霉素10mg。
    7.将培养皿在适温下培养24小时,倒去选择性培养基平板上的水,用缓慢自来水小心冲洗去平板表的土壤颗粒,在显微镜下观察计算厚垣孢子萌发形成的微小菌落的数量。
    采用这种方法,由于过筛时筛去了大量细菌和个体较小的真菌孢子。同时,厚垣孢子在淹水的条件下在选择性培养基上培养,其他真菌几乎都不能生长,因此可以较准确地检测出土壤中厚垣孢子的数量,并获得由厚垣孢子萌发形成的疫霉菌纯培养。但是,应当指出,采用上述方法不能去除土壤中的疫霉菌孢子囊,因此在选择性培养基上形成的微小菌落亦可能由土壤中的疫霉菌孢子囊形成。因此,必需在显微镜下观察,辨认微小菌落是从哪种繁殖体上萌生出来的。

    发布时间: 2009-05-11 19:09 浏览次数:   【 打 印 】【 关 闭
     
      南京农业大学植物保护学院植物病理系 江苏省南京市卫岗1号 邮编:210095
    Tel: 025-84399071 phytophthora@njau.edu.cn
     
      作物疫病信息平台- 建议最佳分辨率1024*768 Copyright © 2007-2008